Restore Western Blot 抗体剥离缓冲液
分类: 最上层  发布时间: 2018-03-24 13:14 

Restore Western Blot 抗体剥离缓冲液
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货号: 10010124
保质期: 2014-01-25
规格: EA
产品特点:
  • 省时-不需重新制胶电泳
  • 节省珍贵样品-在同一张膜上使用相同的样品重新检测
  • 去除效果好-专利配方,远优于自制缓冲液
  • 温和配方-在抗体剥离及重新检测时不会对靶蛋白造成伤害
  • 无气味-不含硫醇意味着无刺鼻气味
  •  经济-比其他竞争厂商的剥离缓冲液便宜

检测不同的一抗

无需浪费珍贵的样品重新制胶电泳来检测不同的一抗。只需使用Restore抗体剥离缓冲液简单地处理膜,即可除去第一种一抗。通常此步骤只需5-15分钟,耗时依赖于一抗的亲和性大小。在抗体剥离之后,可以使用一种新的一抗进行重新检测(见图)。

 

使用不同的抗体进行重新检测。用HeLa细胞裂解液蛋白(从750ng稀释至83.3ng)进行免疫印迹,使用SuperSignal West Dura化学发光底物进行检测。第一张印迹使用1:2000稀释度的兔抗JAK-1多克隆一抗以及1:350000稀释度的辣根过氧化物酶标记二抗进行检测。同一张膜使用Restore Western Blot抗体剥离缓冲液于室温处理5分钟后使用1:1000稀释度的纯化小鼠抗人Bak单克隆一抗以及1:100000稀释度的辣根过氧化物酶标记二抗进行检测。使用含有0.05% Tween*-20的5%脱脂牛奶进行封闭。
 

使用不同的抗体进行重新检测。用HeLa细胞裂解液蛋白(从750ng稀释至83.3ng)进行免疫印迹,使用SuperSignal West Dura化学发光底物进行检测。第一张印迹使用1:2000稀释度的兔抗JAK-1多克隆一抗以及1:350000稀释度的辣根过氧化物酶标记二抗进行检测。同一张膜使用Restore Western Blot抗体剥离缓冲液于室温处理5分钟后使用1:1000稀释度的纯化小鼠抗人Bak单克隆一抗以及1:100000稀释度的辣根过氧化物酶标记二抗进行检测。使用含有0.05% Tween*-20的5%脱脂牛奶进行封闭。
 
优化实验条件
使用Thermo Scientific SuperSignal West底物,只需在一次抗体剥离及重新检测循环之后即可优化二抗的浓度(见图)。化学发光检测系统可以最灵敏地检测在抗体剥离过程后仍然结合在膜上的所有试剂。

抗体优化研究。使用SuperSignal West Pico化学发光底物对白介素-2(稀释度为20-0.156ng)进行免疫印迹检测。第一个印迹(A)使用1/1000(0.5μg/ml)的兔抗大鼠IL-2一抗和1/5000的辣根过氧化物酶标记的山羊抗大鼠二抗(目录号31470)进行检测。同一张膜使用Restore Western Blot抗体剥离缓冲液(B)于室温处理5分钟后使用1/5000稀释度的一抗和1/20000的辣根过氧化物酶标记二抗重新检测(C)。使用Thermo Scientific SuperBlock封闭缓冲液进行封闭。
 
温馨提示:不可用于临床治疗。
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